分析大鼠膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的影響的要素

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的血脂與中醫(yī)學(xué)中 “膏脂”的意義頗為相似， 《王氏醫(yī)存》有云: “肥人多痰，肥 人之病，皆因脾濕所致”，揭示脾虛與痰濕脂濁的 形成密切相關(guān)。脾為后天之本，主升清運(yùn)化， 脾失健運(yùn)，則津液代謝異常、濁脂內(nèi)生。課題組前 期研究發(fā)現(xiàn)，脾虛狀態(tài)下機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂程度加劇?；谏鲜霾C(jī)，課題組應(yīng)用健脾降濁法作 為調(diào)節(jié)脾虛高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝紊亂的主要治 法。香砂六君子湯為益氣健脾、溫中化痰經(jīng)典方劑，有研究發(fā)現(xiàn)，香砂六君子湯在降血脂、抗 氧化及抗炎癥等方面療效顯著，對動脈粥樣硬化有 明顯的改善作用。

SPF 級 SD 大鼠 40 只，8 周齡，體重 ( 190 ± 20) g，由遼寧長生生物科技股份有限公司提供， 實驗動物許可證號: SCXK ( 遼) 2015-0001。飼養(yǎng) 于遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，室內(nèi)溫度 18 ～ 22℃，濕度 40% ～ 70% ，單籠飼養(yǎng)，每天 12 /12h 晝夜明暗交替。動物實驗符合遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗 動物倫理委員會標(biāo)準(zhǔn)，實驗動物倫理審查編號 21006092017056。

香砂六君子湯由木香 6 g、砂仁 3 g、黨參 12 g、 茯苓 12 g、白術(shù) 12 g、法半夏 6 g、陳皮 6 g、炙甘 草 6 g 組成，以上中藥飲片均購于遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 附屬醫(yī)院。藥物浸泡 1 h 后，武火煮沸，文火煮 20 min，過濾，重復(fù)煎 3 次，合并濾液，濃縮至含 生藥 0. 57 g /ml 和 1. 14 g /ml，冷卻后 4℃保存。

高脂飼料 ( 10% 豬油，1% 膽固醇，0. 5% 膽 酸鈉，0. 2% 甲基硫氧嘧啶，5% 蔗糖，加 83. 3% 普通飼料，北京科澳協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)，批 號: 201708180) ; HE 染色試劑盒 ( 碧云天生物技 術(shù)有限公司，批號: C0105) ; D-木糖試劑盒 ( 南 京建 成 生 物 工 程 研 究 所，批 號: A035 ) ; Trizol ( 批號: CW0580) 、SYBＲ Green Mater Mix 試劑盒 ( 批號: CW2582) ，康為世紀(jì)生物科技有限公司; 4% 組織細(xì)胞固定液 ( 北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限 責(zé)任公司，批號: AＲ-0211) ; 水合氯醛 ( 天津市 大茂化學(xué)試劑廠，批號: AＲ 302-17-0) ; 磷脂轉(zhuǎn)移 蛋白 ( PLTP，批號: ml059545) 、卵磷脂膽固醇脂 酰轉(zhuǎn)移酶 ( LCAT，批號: ml520176) 、膽固醇酯轉(zhuǎn) 蛋白 ( CETP，批號: ml003189) 酶聯(lián)免疫分析試 劑盒，上海酶聯(lián)生物科技有限公司。 SHZ-88 型水浴恒溫振蕩器 ( 其林貝爾儀器制造有限公司) ; MULTISKAN FC 型酶標(biāo)儀、ST16Ｒ 型冷凍高速離心機(jī) ( Thermo 公司) ; BioSpec-nano 型紫外可見分光光度計 ( 日本島津公司) ; 7500 型 實時 定 量 PCＲ 儀 ( Applied Biosystems 公 司 ) ; TAB-120FＲ 型全自動生化分析儀 ( 日本 東 芝 公 司) ; DM IL LED 普通型光學(xué)顯微鏡、ASP 6025 型 全自動脫水機(jī)、ＲM2235 型手動石蠟切片機(jī)、EG 1150H 型包埋機(jī)、HI1220 型烘片機(jī)，均購自 Leica 公司。

40 只 SD 大鼠普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng) 1 周后，按 體重采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對照組、高脂組、 脾虛高脂組、香砂六君子湯正常劑量組及香砂六君 子湯高劑量組，每組 8 只。脾虛高脂組、香砂六君 子湯正常劑量組及香砂六君子湯高劑量組大鼠采用 飲食不節(jié)加力竭游泳的復(fù)合方法造脾虛模型: 飽食 1 天，禁食 2 天，飲水不限。同時，每日將大 鼠于 35 ～ 37℃ 水中游泳至力竭，連續(xù)造模 15 天。 正常對照組喂飼基礎(chǔ)飼料，其余各組喂飼高脂飼料 14 周建立高脂血癥模型，自由攝食，飲水不限。 于第 10 周灌胃給藥，按人和動物體表面積折算系 數(shù)換算，香砂六君子湯正常劑量組 ( 人體臨床 等效劑量) 及香砂六君子湯高劑量組分別給予香 砂六君子湯 5. 67、11. 34 g /( kg·d) 灌胃，正常對 照組、高脂組及脾虛高脂組給予等體積的生理鹽水 灌胃，4 周后取材。

正常對照組肝細(xì)胞核圓且居中，細(xì)胞索結(jié)構(gòu)清 晰，肝竇正常; 與正常對照組比較，高脂組和脾虛 高脂組肝細(xì)胞腫大變圓，空泡化明顯，肝細(xì)胞形態(tài) 疏松，部分細(xì)胞核擠向胞膜，就空泡密度而言，脾 虛高脂組大鼠肝臟組織泡沫化更為嚴(yán)重; 香砂六君 子湯正常劑量組和香砂六君子湯高劑量組大鼠肝臟 細(xì)胞脂肪空泡顯著減少，肝細(xì)胞腫脹減輕，細(xì)胞排列 整齊清晰，胞核正常，兩組間差異不明顯。

高脂血癥是由多種因素引起的脂質(zhì)代謝性疾 病，與心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。根 據(jù)其病變特點將其歸于中醫(yī)學(xué) “痰濁” “脂濁”等 范疇，多為脾腎不足、瘀血痰濁日久，而致清濁不 分、濕濁痰凝瘀血積聚而形成的本虛標(biāo)實之證。 王智玉研究發(fā)現(xiàn)，痰濕、氣虛體質(zhì)與高脂血癥 發(fā)病率呈正相關(guān)。痰濕體質(zhì)多由脾虛失運(yùn)或過食肥 甘厚味而致水液內(nèi)停、聚而生痰，痰滯日久則阻滯 氣機(jī)，濁脂內(nèi)生。氣虛體質(zhì)之人多由先天后天之氣 生化無源或消耗過多引發(fā)，氣虛、痰濕的形成過程 皆與脾虛密切相關(guān)。課題組選用具有益氣健脾、行 氣化痰的香砂六君子湯加以治療，方中黨參、白術(shù)、茯苓、炙甘草健脾益氣滲濕，陳皮、半夏行氣 燥濕化痰，木香、砂仁相使而用，加強(qiáng)行氣止痛化 濕、燥濕健脾和胃的功效，使痰濁得化、氣虛得補(bǔ)。

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