貝爾搖床的細胞比例對增強其毒性分析

對象與方法

注射用醋酸西曲瑞克（GnRH-ant，Merck，德國）， 人絕經(jīng)期尿促性腺激素（human menopausal gonadotropin， HMG，麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司），人絨毛膜促性腺激 素（human chorionic gonadotropin，HCG，麗珠醫(yī)藥集團 股份有限公司）。胞內染色試劑盒（BioLegend，美國）， Annexin Ⅴ染色試劑盒 [ 賽默飛世爾科技（中國）有限公 司 ]。5- 溴脫氧尿嘧啶核苷（5-bromodexyuirdine，BrdU， Sigma，美國），Ⅳ型膠原酶（Sigma，美國）。搖床（海門市其林貝爾儀器制造有限公司），低溫離心機（Eppendorf， 德國），流式細胞儀（BD，美國）。使用眼科剪將收集的小 鼠子宮組織剪碎至約 1 mm3 碎塊，經(jīng)Ⅳ型膠原酶消化后 加入含 5% 胎牛血清培養(yǎng)液終止消化。

結果

以 CD45、CD3 和 NK1.1 標記小鼠 uNK 細胞后，采 用熒光標記的磷脂結合蛋白 Annexin Ⅴ染色，并用流式細 胞術檢測 GnRH-ant 對 uNK 細胞凋亡的影響。結果顯示，與對照組相比，GnRH-ant 組小鼠 uNK 細胞凋亡水 平下降（P=0.004）。Pf 和 Gz-B 是 NK 細胞發(fā)揮毒性作用的主要細胞因 子，本研究對小鼠 uNK 細胞內的這 2 個因子的表達水平 進行分析，結果顯示，與對照組相比，GnRH-ant 組小鼠 uNK 細胞內 Pf（P=0.000）和 Gz-B（P=0.034）的 表達水平均較高。近年來，GnRH-ant 方案憑借其簡便、靈活、安全、有 效等優(yōu)勢在輔助生殖領域得到了廣泛應用，但 GnRH-ant 對內膜容受性的不利影響使得該方案的胚胎種植率及臨床 妊娠率偏低 。與自然周期方案 組相比，GnRH-ant 方案組子宮內膜中多種與細胞黏附、信 號轉導及 T 細胞受體信號通路相關的基因表達發(fā)生了顯著變化

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