其林貝爾渦旋混合器代謝組學研究

材料與方法

乙腈( 質(zhì)譜級，美國 Fisher 公司，批號: 142146) 、甲酸( 質(zhì)譜級，美國 Fisher 公司， 批號: 140362) ，蒸餾水( 屈臣氏) 。美國 UPLC － Q － TOF 儀( Waters，SYNAPT G2 UPLC － Q － TOF) ; VOＲ － TEX － 5 渦旋混合器( 江蘇海門其林貝爾儀器制造有 限公司) ; MIKＲ022Ｒ 臺式高速冷凍離心機 ( LAB － WAYSCIENCE，德 國) 。實 驗 用 藥: 鹽 酸 克 林 霉 素 ( CAS321462 － 39 － 5，UPS 級，83% ，800 μg /mg) ; 大黃( 產(chǎn)地: 甘肅) 購于北京中醫(yī)藥大學東方醫(yī)院中藥房。

代謝組學檢測

與空白對照組大鼠比較， AAD 組大鼠大便次數(shù)增多、大便稀薄，毛失去光澤，活 動減少，肛周有污物，便涂片示球菌/桿菌比異常; 脾陽 虛證組大鼠，神疲乏力，反應(yīng)遲鈍，行動緩慢，被毛蓬起 無光澤，弓背、扎堆，肛溫下降、便溏，肛周污穢，毛色枯 槁無光澤。兩組造模均成功。分析前，將凍存的血清于 37 ℃ 復融 2 min，各取 200 μL 血清于 EP 管，加入 600 μL 乙 腈，渦旋 10 min。4 ℃ 下 12 000 r/min 離心 10 min 去 除蛋白。吸取上清液 700 μL 于新的 EP 管，氮氣吹干， 樣品保存于 － 20 ℃冰箱冷藏，待檢測。各血清樣品分 別抽取 40 μL 混勻通過上述制備方法得到質(zhì)量控制 ( QC) 樣品。氮氣吹干的樣品，分別加入 10% 乙腈 200 μL 于 EP 管復溶，4 ℃ 下 12 000 r/min 離心10 min，取 上清液 150 μL 于進樣小管，等待進樣。

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