牙周炎與冠心病相關(guān)性中的作用-離心機(jī)使用

慢性牙周炎是牙周組織的慢性感染性疾病。冠 心病（coronary heart disease，CHD）是一種以動 脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）為基本病變的 心血管疾病。近年來，AS被認(rèn)為與全身炎癥水平升高有關(guān)，為慢性炎癥性疾病。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)慢 性牙周炎與CHD的發(fā)生發(fā)展呈正相關(guān)，慢性牙周炎 可能是CHD的危險因素。BECK等、楊鐮微等經(jīng) 過大樣本的追蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)牙周炎患者的CHD危險 度顯著升高。另有研究表明牙周治療有助于心血管 疾病患者血管內(nèi)皮功能的改善。

1 對象和方法

1.1 對象

選取2015年7月至2016年5月就診于溫 州市中醫(yī)院口腔科及溫州市人民醫(yī)院心內(nèi)科的129 例研究對象。其中健康者39例（HC組），中重度牙 周炎患者35例（PD組），單純CHD患者31例（CHD組）， CHD伴中重度牙周炎患者24例（PD+CHD組）。納入標(biāo) 準(zhǔn)：
①年齡40～65歲；
②試驗前1個月內(nèi)未服用抗 菌藥物；
③試驗前6個月內(nèi)無牙周治療史；
④婦女 未妊娠；
⑤無飲酒、吸煙等嗜好。其中CHD的診斷 標(biāo)準(zhǔn)：左冠狀動脈前降支、回旋支或右冠脈及其分 支中、或左主干存在＞50%直徑的固定性狹窄或阻 塞性病變。根據(jù)ARMITAGE等報道，牙周健康或齦 炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)：全口牙平均臨床附著喪失（clinical attachment loss，CAL）≤0.5 mm，同時鄰面CAL≥ 3 mm的位點=0，且失牙數(shù)≤2。中重度慢性牙周炎 的診斷標(biāo)準(zhǔn)如下：全口牙平均CAL≥1.6 mm，同時 鄰面CAL≥3 mm的位點分布于3個不同區(qū)段或至少 有6顆牙，且失牙數(shù)≤14。本研究獲浙江中醫(yī)藥大 學(xué)附屬溫州市中醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所有研究對 象均知情同意。

1.2 主要試劑與儀器

IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1 多因子ELISA檢測試劑盒（杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限 公司）、液相芯片分析系統(tǒng)（美國Luminex公司）、酶 標(biāo)儀（美國Thermo公司）、振蕩器（江蘇其林貝爾儀 器制造有限公司）、渦旋混合器（江蘇其林貝爾儀器制造有限公司）、離心機(jī)（江蘇其林貝爾儀器制造有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 臨床檢查

記錄每位研究對象全口牙（除第 三磨牙外）的牙周狀況檢測結(jié)果。檢查內(nèi)容包括探 診出血（bleeding on probing，BOP）、牙周袋探診 深度（pocket probing depth，PPD）、CAL。測量每顆牙的頰、舌側(cè)遠(yuǎn)中、正中和近中6個位點，取平均 值作為該牙測量結(jié)果，全口牙平均值作為該研究對 象的測量結(jié)果。記錄所有研究對象的血壓、BMI等 信息。

1.3.2 血清樣本的收集及制備

所有納入的受檢 者抽取空腹靜脈血5 mL，靜置1 h后，用4 ℃低溫 離心機(jī)（3 000 r/min）離心10 min，得到血清樣本， 登記編號，-70 ℃凍存。

1.3.3 血清相關(guān)炎癥因子水平的測定

血清標(biāo)本 在室溫下融解，采用Procarta Plex多因子ELISA試 劑盒檢測血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1的含量。 用Procarta Plex Analyst 1.0 Software軟件計算， 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，MFI值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行五參 數(shù)Logarithmic axis回歸擬合生成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理方法

采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行 統(tǒng)計學(xué)分析。各組間IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1水 平的比較采用單因素方差分析，多重比較采用SNK 法，計數(shù)資料采用χ2 檢驗，校正混雜因素采用協(xié)方 差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

一般情況 各組間性別、年齡、教育程度、職 業(yè)情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），在各組基本 平均分布。見表1。其中CHD組、PD+CHD組患者的血 壓、BMI顯著高于HC組和PD組（P＜0.05），而HC組 和PD組之間以及CHD組和PD+CHD組之間的血壓、BMI 差異則無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。CAL除HC組與CHD組間差異無 統(tǒng)計學(xué)意義外，在其余組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 （P＜0.05）；PD組的CAL值最高，HC組和CHD組最低。 所有組間PPD差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；PD+ CHD組、PD組、CHD組、HC組依次下降。除HC組與 CHD組間、PD組與PD+CHD組間BOP差異無統(tǒng)計學(xué)意 義外，其余組間BOP差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）； PD組、PD+CHD組高于HC組和CHD組。見表2。

兩比較結(jié)果表明：IL-1β水平在各組間差異均有統(tǒng) 計學(xué)意義，PD+CHD組最高，CHD組其次，PD組次之， 均較HC組高（P＜0.05）；就IL-6而言，除了PD組與 CHD組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）以外，其余 組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），PD+CHD組最 高，HC組最低；TNF-α與IL-6類似，除了PD組與CHD 組間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）以外，其余各 組間TNF-α差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），PD+CHD 組最高，HC組最低；MCP-1的表達(dá)在HC組與PD組之 間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），在PD組與CHD組 之間差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），其余組間差 異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），PD+CHD組最高。經(jīng)協(xié)方差分析校正混雜因素BMI和血壓的影響 后，結(jié)果顯示，各組血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1 水平的差異仍具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。經(jīng)SNK 法多重比較表明，各組間4 種炎癥因子水平的差異 與未校正前一致。

3 討論

慢性牙周炎和CHD皆是慢性感染性疾病。本課 題組前期系列研究發(fā)現(xiàn)，中重度慢性牙周炎與CHD 的發(fā)病顯著相關(guān)（OR=2.555，95%CI=1.096～5.958）。 牙周炎是如何促進(jìn)CHD的發(fā)生發(fā)展以及它們的相關(guān)機(jī)制，一直為人們所關(guān)注。